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Technical articlesFluoroskan 系列酶標(biāo)儀是 Thermo Fisher Scientific 推出的多模式微孔板檢測(cè)設(shè)備,專為熒光檢測(cè)而設(shè)計(jì)。其主要功能為熒光強(qiáng)度測(cè)量,廣泛用于分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)以及藥物篩選等實(shí)驗(yàn)中。Fluoroskan 適用于多種基于熒光的檢測(cè)方法,例如熒光 ELISA、熒光染料法細(xì)胞分析、蛋白質(zhì)與核酸定量、酶活性測(cè)定等。
隨著實(shí)驗(yàn)室設(shè)備更替頻率的提高,二手設(shè)備市場(chǎng)逐漸成熟。對(duì)于預(yù)算有限但對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)質(zhì)量仍有一定要求的實(shí)驗(yàn)室而言,選購狀態(tài)良好的二手 Fluoroskan 酶標(biāo)儀,是一種可行的方案。
本文將詳細(xì)解析 Fluoroskan 酶標(biāo)儀的工作原理、功能特性、適用領(lǐng)域與采購注意事項(xiàng),為科研人員或?qū)嶒?yàn)室管理者提供技術(shù)與應(yīng)用參考。
Fluoroskan 酶標(biāo)儀采用熒光檢測(cè)原理進(jìn)行分析。其核心機(jī)制包括:
激發(fā)光源發(fā)出特定波長的光照射樣品;
樣品內(nèi)熒光染料吸收激發(fā)光后發(fā)射出另一波長的熒光;
檢測(cè)器接收發(fā)射光信號(hào)并轉(zhuǎn)化為電信號(hào),再由系統(tǒng)進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和記錄。
儀器通過濾光片或單色器精確調(diào)節(jié)激發(fā)波長與發(fā)射波長,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)特定熒光信號(hào)的檢測(cè)。相比于吸光度檢測(cè),熒光檢測(cè)靈敏度更高,適合檢測(cè)微量成分和弱信號(hào)。
Fluoroskan 酶標(biāo)儀支持雙波長(激發(fā)與發(fā)射)熒光檢測(cè),涵蓋從 UV 至近紅外范圍,具體波長范圍依型號(hào)而定??勺杂筛鼡Q濾光片,適應(yīng)不同熒光染料與實(shí)驗(yàn)方案。
用戶可調(diào)節(jié)讀取時(shí)間、延遲時(shí)間、讀取高度、孔間間隔等參數(shù),以適配不同反應(yīng)體系的光學(xué)特性,從而提高信號(hào)穩(wěn)定性與準(zhǔn)確性。
儀器兼容 96 孔、384 孔板,部分型號(hào)支持 24 孔板,適合不同實(shí)驗(yàn)通量需求。同時(shí)支持末端點(diǎn)測(cè)量和動(dòng)力學(xué)監(jiān)測(cè),可進(jìn)行時(shí)間分辨檢測(cè)。
某些 Fluoroskan 型號(hào)帶有加熱模塊,可將樣品維持在設(shè)定溫度,適用于對(duì)溫度敏感的反應(yīng),如酶促動(dòng)力學(xué)分析。
Fluoroskan 通常與 Thermo Fisher 提供的 SkanIt 軟件配合使用。軟件提供方法編輯、數(shù)據(jù)處理、圖表輸出、標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合、結(jié)果導(dǎo)出等功能,操作流程直觀,支持自動(dòng)化分析。
項(xiàng)目 | 說明 |
---|---|
檢測(cè)模式 | 熒光強(qiáng)度(FI) |
激發(fā)波長范圍 | 320–700 nm(依濾光片配置) |
發(fā)射波長范圍 | 360–800 nm(依濾光片配置) |
波長切換方式 | 更換濾光片(最多可裝載 8 對(duì)濾光片) |
孔板類型 | 96 孔、384 孔微孔板 |
讀板時(shí)間 | 96 孔板約 10 秒以內(nèi)(具體依參數(shù)) |
靈敏度 | 可達(dá)皮摩爾級(jí)(取決于染料及設(shè)定) |
動(dòng)力學(xué)分析 | 支持多時(shí)間點(diǎn)監(jiān)測(cè) |
溫控功能 | 有些型號(hào)支持(環(huán)境溫度至 45°C) |
軟件平臺(tái) | SkanIt 軟件,支持多語言、數(shù)據(jù)導(dǎo)出 |
數(shù)據(jù)導(dǎo)出 | USB、局域網(wǎng)(選配) |
Fluoroskan 酶標(biāo)儀因其較高靈敏度與靈活性,被廣泛用于以下研究與分析場(chǎng)景:
相較于比色法,熒光 ELISA 具有更高靈敏度與更低背景干擾,常用于檢測(cè)低豐度的生物標(biāo)志物,如細(xì)胞因子、激素、病毒抗體等。
通過熒光染料標(biāo)記活細(xì)胞或細(xì)胞器,分析細(xì)胞凋亡、氧化應(yīng)激、線粒體活性等生物學(xué)過程。例如使用 DCFH-DA 測(cè)定活性氧水平,或 Calcein-AM 標(biāo)記活細(xì)胞。
利用熒光染料(如 PicoGreen、SYBR Green)結(jié)合 DNA 或 RNA 后的熒光強(qiáng)度變化,進(jìn)行核酸濃度測(cè)量。適用于微量核酸定量、PCR 前模板評(píng)估等。
適用于酶標(biāo)底物轉(zhuǎn)化為熒光產(chǎn)物的反應(yīng)體系,如酯酶、蛋白酶等酶的活性評(píng)估與抑制劑篩選。適用于藥物篩選與機(jī)制研究。
搭配自動(dòng)化加樣平臺(tái)與384孔板,F(xiàn)luoroskan 可用于中小型藥物篩選實(shí)驗(yàn),評(píng)估化合物對(duì)細(xì)胞活性、酶活或信號(hào)通路的影響。
購買二手 Fluoroskan 酶標(biāo)儀時(shí),應(yīng)關(guān)注以下幾個(gè)方面,以確保設(shè)備運(yùn)行正常、數(shù)據(jù)可靠:
仔細(xì)檢查機(jī)身有無裂痕、液體腐蝕痕跡;
樣品倉運(yùn)動(dòng)是否順暢;
顯示界面是否正常;
檢測(cè)器讀數(shù)是否有異常漂移。
驗(yàn)證激發(fā)與發(fā)射濾光片是否齊全;
通過標(biāo)準(zhǔn)熒光溶液檢測(cè)信號(hào)靈敏度;
檢測(cè)不同波長組合的背景噪聲水平與信噪比。
檢查是否配備原廠 SkanIt 軟件及許可證;
測(cè)試實(shí)驗(yàn)方案建立、數(shù)據(jù)采集與導(dǎo)出流程;
檢查數(shù)據(jù)導(dǎo)出的格式是否滿足實(shí)際需求。
是否附帶完整濾光片組;
光源(如氙燈、LED)使用壽命剩余時(shí)長;
數(shù)據(jù)線、電源線、操作說明書是否齊備。
了解賣方是否提供質(zhì)保期與調(diào)試服務(wù);
是否可聯(lián)系第三方或原廠進(jìn)行后期維護(hù)與年檢;
是否提供上門安裝或遠(yuǎn)程技術(shù)支持。
為了延長二手 Fluoroskan 的使用壽命與保持實(shí)驗(yàn)精度,建議用戶遵循以下操作規(guī)程:
每次實(shí)驗(yàn)后用無塵布擦拭樣品托盤與光學(xué)窗口;
定期對(duì)濾光片進(jìn)行檢查與清潔;
避免樣品溢出污染內(nèi)部部件;
不使用時(shí)斷電保存,避免光源老化;
每年進(jìn)行一次系統(tǒng)校準(zhǔn)或性能驗(yàn)證。
賽默飛 Fluoroskan 酶標(biāo)儀憑借其熒光檢測(cè)能力,在科研、醫(yī)藥、生物技術(shù)等領(lǐng)域具有廣泛用途。對(duì)于實(shí)驗(yàn)通量適中、預(yù)算有限的單位,選擇一臺(tái)性能良好、校準(zhǔn)合格的二手設(shè)備,是一種具備成本效益的選擇。
在采購過程中,應(yīng)結(jié)合實(shí)驗(yàn)需求、儀器配置、使用年限與維護(hù)歷史,綜合評(píng)估設(shè)備價(jià)值。通過合理使用與定期維護(hù),二手 Fluoroskan 酶標(biāo)儀依然能夠?yàn)楦黝悓?shí)驗(yàn)任務(wù)提供穩(wěn)定、可靠的數(shù)據(jù)支持。